EFLUXO ASSOCIADO À RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA NO COMPLEXO Mycobacterium avium
Autor: Michael Andres Abril Gomez (Currículo Lattes)
Resumo
Micobactérias do complexo Mycobacterium avium (CMA) são responsáveis por diversas infecções, principalmente pulmonares. Mundialmente distribuído, membros do CMA apresentam altas taxas de resistência aos antimicrobianos (ATM) considerados eficazes para o tratamento destas infecções. Mutações em genes que codificam alvos de ação dos ATM estão frequentemente relacionadas a resistência. Além disso, o mecanismo de efluxo também pode estar envolvido com os fenótipos resistentes aos ATM. Neste sentido, esta dissertação tem como objetivo estudar a relação entre o mecanismo de efluxo e a resistência aos ATM, em espécies do CMA, além de avaliar potenciais compostos inibidores de bombas de efluxo (IE), que possam atuar como moduladores da resistência antimicrobiana nessas espécies. Para isto, foram incluídas onze cepas de CMA de origem pulmonar, cinco identificadas como M. avium e seis como M. intracellulare. A partir da determinação das concentrações mínimas inibitórias (CMI) dos ATM, claritromicina (CLA), rifampicina (RIF), amicacina (AMI) e etambutol (EMB), encontramos que 36% (4/11) das cepas avaliadas apresentaram resistência a pelo menos um dos ATM testados, neste sentido, a análise de mutações relacionadas a resistência a CLA, mostrou que 90% (10/11) das cepas avaliadas tinha uma sequência do gene 23S rRNA conservada e, uma única cepa, com alto nível de resistência fenotípica a CLA, apresentou mutação pontual na posição 2058 (AT). A CMI dos candidatos a IE, verapamil (VP), tioridazina (TZ), ácido úsnico (AUS) e o derivado de tetrahidropiridina NUNL2, também foi determinada, e a interação entre os ATM e os IE foi avaliada por ensaios modulatórios, nos quais destacou-se uma atividade significativa do AUS e do NUNL2 na redução da CMI dos ATM, frente as cepas de CMA com fenótipo de resistência. A fim de confirmar a presença da atividade do efluxo, foram realizados ensaios fluorimétricos de acumulação de brometo de etídio. Tanto os IE clássicos, quanto o AUS e o NUNL2 mostraram atividade como IE frente as quatro cepas avaliadas. Cabe destacar que os novos compostos testados, AUS e NUNL2, também apresentaram atividade antimicrobiana frente a todas as onze cepas do CMA testadas. Estes resultados permitem inferir que o mecanismo de efluxo possa estar relacionado com a resistência aos ATM em cepas do CMA, e desta forma, os IE podem ser uma estratégia para o tratamento de infecções com estas micobactérias.
EFLUXO ASSOCIADO À RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA NO COMPLEXO Mycobacterium avium